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      B27無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點和使用方法

      發(fā)布時間: 2018-08-28  點擊次數(shù): 2821次
      B27無血清培養(yǎng)基不含有蛋白質(zhì),但可能含有植物或酵母的水解產(chǎn)物。很多B27無血清培養(yǎng)基都不含動物來源成分。
      B27無血清培養(yǎng)基的基本配方:
      基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時,多數(shù)呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當(dāng)其在B27無血清培養(yǎng)基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細(xì)胞往往以懸浮形式生長。
       
      B27無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點:
      增加確定性。
      性能更加一致。
      容易進(jìn)行純化和后期處理。
      對細(xì)胞功能進(jìn)行評估。
      增強(qiáng)生長和/或產(chǎn)量。
      生理反應(yīng)性的更好對照。
      加強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)的檢測。
       
      B27無血清培養(yǎng)基使用方法
      血清仍是動物細(xì)胞培養(yǎng)中基本的的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或者細(xì)胞生長狀況不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長旺盛以后,再換成無血清培養(yǎng)液。
      細(xì)胞轉(zhuǎn)入B27無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個適應(yīng)過程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無血清培養(yǎng)。在降低過程中要注意觀察細(xì)胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細(xì)胞死亡,存活細(xì)胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。
      在實驗后這些細(xì)胞一般不再繼續(xù)保留,很少有細(xì)胞能夠長期培養(yǎng)于B27無血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細(xì)胞轉(zhuǎn)入B27無血清培養(yǎng)基之前,要留有種子細(xì)胞,種子細(xì)胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,以保證細(xì)胞的特性不發(fā)生變化。
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